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維護液相色譜的有關知識和經(jīng)驗
更新時間:2010-05-27   點擊次數(shù):3425次

 

一、混合溶劑必需要過濾以后才能混合,萬一要混合后過濾的話,只能用有機的,不能用水系的。由于水系的材料是纖維素,有機相回或多或少的溶解一點纖維素的,造成污染。
  二、標樣或樣品用活動相溶解(排除特殊情況),可以避免良多麻煩。
  三、給色譜柱加溫,溫度升高的目的,部門在于增加溶質(zhì)的溶解度,但更重要的是降低溶劑的黏度,從而改進峰形和分離度。留意:溫度升高會降低留存時間,這對分離度也有影響,溫度的變化對譜帶寬度的影響甚大,而塔板高度受溫度的影響固然也取決于所采用的色譜類型,而溫度升高老是要降低塔板高度的。
  四、C18柱的柱溫一般不要超過40攝氏度,否則健合相輕易脫落的。
  五、進樣器使用,除每次用水清洗外,隔一段時間后,用甲醇或乙腈反復吸取,清洗一下。
  六、用HPLC進行分析時留存時間有時發(fā)生漂移,有時發(fā)生快速變化,原因何在?如何解決?
  答:關于漂移題目:
  1、溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定
  2、活動相發(fā)生變化,解決辦法是防止活動相發(fā)生蒸發(fā)、反應等
  3、柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡
  七、關于快速變化題目:
  1、流速發(fā)生變化,解決辦法是重新設定流速,使之保持不亂
  2、泵中有氣泡,可通過排氣等操縱將氣泡趕出。
  3、活動相分歧適,解決辦法為改換活動相或使活動相在控制室內(nèi)進行適當混合
  八、液相色譜中峰泛起拖尾或泛起雙峰的原因是什么?
  1、篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖刷柱子,替代篩板或更換柱子。
  2、存在干擾峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換活動相或更換選擇性好的柱子
  九、毛細管色譜分流進樣時,非線性分流的主要原因是什么?
  1、進樣器溫度太低,樣品汽化不*,發(fā)生分級分流。
  2、進樣器溫度太高,某些組分可能發(fā)生熱分解,也有的樣品可能發(fā)生催化分解,或樣品部門地被吸附在進樣器內(nèi)表面上。
  3、在分流點以前樣品沒有混合平均或混合不充分。
  4、系統(tǒng)的進樣墊,柱接頭等地方漏氣。
  十、做液相色譜分析時,柱壓不不亂,原因何在?如何解決?
  答:原因可能有:
  1、泵內(nèi)有空氣,解決的辦法是清除泵內(nèi)空氣,對溶劑進行脫氣處理;
  2、比例閥失效,更換比例閥即可。
  3、泵密封墊損壞,更換密封墊即可。
  4、溶劑中的氣泡,解決的辦法是對溶劑脫氣,必要時改變脫氣方法;
  5、系統(tǒng)檢漏,找出漏點,密封即可。
  6、梯度洗脫,這時壓力波動是正常的。
  十一、做PGS/MS分析時,如何防止焦油狀污染物進入毛細柱?
  答:聚合物,尤其是一些含氮、硫及鹵素的高分子裂解時,常有焦油狀物質(zhì)產(chǎn)生。為防止這種焦油狀物質(zhì)進入毛細柱造成污染而使柱機能下降,可采用保護預柱,即在裂解器與毛細柱之間接一填充預柱,通過控制預柱溫度而使焦油狀物質(zhì)滯留在預柱內(nèi),預注可置于GC氣化室內(nèi),這樣既輕易控制溫度,又減少系統(tǒng)的死體積,當然,預柱填料需常常更換。
  十二、我zui近更換了另一種牌號的ODS柱,固然分離情況仍可以,但留存時間不能重現(xiàn),為什么?
  答:這是由于被分析物可能具有形成氫健的能力。液相色譜儀盡管過去幾年來,填料的制造技術(shù)有了極大的進步,但不同的廠商的ODS填料表面硅醇基的濃度不同。恰是這些硅醇基可能與樣品發(fā)生相互作用。因此,統(tǒng)一被分析物中的各組分在不同牌號的ODS柱上的相對留存時間就可能不同。在活動相中加入少量競爭物,如三乙基胺(TEA),將會使硅醇基的成鍵能力飽和,從而保證不同牌號柱子上的相對留存時間具有較好的重現(xiàn)性。
  十三、高溫毛細柱的使用壽命一般為多長?
  答:毛細柱壽命除決定于柱子本身的機能外,在很大程度上取決于使用情況,好比使用溫度、樣品狀態(tài),進樣量等,假如在其使用溫度范圍內(nèi),樣品干凈,色譜柱不被污染的情況下,柱子壽命一般在23年之間。
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